微生物常用玻璃器皿清洁方法
清洁的玻璃器皿是得到正确的实验结果的重要条件之一。清洗的目的就在于除去玻璃器皿上的污垢(灰尘、油污、
无机盐等物质),使其不能妨碍得到正确的实验结果。通常清洗方法有两种,一是机械清洗方法,即用铲、刮、刷
等方法清洗;二是化学清洗方法,即用各种化学去污溶剂清洗。具体的清洗方法要依污垢附着表面的状况及污垢的
性质决定。
1 实验室常用洗涤剂的种类及其应用
(1)肥皂使用时多用湿刷子(试管刷、瓶刷)沾肥皂刷洗容器,再用水洗去肥皂。热的肥皂水(5%)去污力很强
,洗去器皿上的油脂很有效。
(2)去污粉 用时将一般玻璃器皿或搪瓷器皿润湿,将去污粉涂在污点上,用布或刷子擦拭,再用水洗去去污粉。
(3)洗衣粉 常用1%的洗衣粉溶液洗涤载玻片和盖玻片,能达到良好的清洁效果。
(4)洗涤液通常用的洗涤液是重铬酸钾(或重铬酸钠)的硫酸溶液。重铬酸钾(或重铬酸钠)与硫酸作用后形成
铬酸。铬酸是一种强氧化剂,去污能力很强,实验室常用之洗去玻璃和瓷质器皿上的有机质。切不可用于洗涤金属
器皿。
洗涤液分为浓溶液和稀溶液两种,配方如下:
a 浓配方:重铬酸钾(工业用)50g,蒸馏水150mL,浓硫酸(粗)800mL。
b 稀配方:重铬酸钾(工业用)50g,蒸馏水850mL,浓硫酸(粗)100mL。
配法:将重铬酸钾溶解在温热蒸馏水中(可加热),待冷却后,再缓慢加入浓硫酸,边加边搅拌。配好的溶液呈棕
红色或橘红色。应始终存储于有盖容器内,以防变质。此液可多次使用,直至溶液变成青褐色或墨绿色时失效。
2 各种玻璃器皿的洗涤方法
(1)新玻璃器皿的洗涤法新购置的玻璃器皿(包括载玻片、盖玻片、试管、吸管、平皿、三角瓶等)含有游离碱
,应用2%的盐酸溶液浸泡数小时,以中和其碱质,再用水充分冲洗干净。
(2)载玻片及盖玻片的洗涤法用过的载玻片放入1%洗衣粉溶液中煮沸20~30min(注意溶液一定要浸没玻片,否
则会使玻片钙化变质),待冷却后,逐个用自来水洗净,浸泡于95%的乙醇中备用。盖玻片散入1%的洗衣粉溶液
中,煮沸1min,待稍冷后再煮沸1min,如此重复2~3次(如煮沸时间过长会使玻片钙化变白且变脆易碎)。待冷却
后用自来水冲洗。洗净后于95%的乙醇中浸泡。带有活菌的载玻片或盖玻片可先浸在5%石炭酸,或2~3%来苏水
,或0.1%升汞溶液中消毒24~48小时后,再按上述方法洗涤。使用前,可用干净纱布擦去酒精,并经火焰微热,
使残余酒精挥发,再用水滴检查,如水滴在玻片上均匀散开,方可使用。
(3)血球计数板的清洗 血球计数板(或Petrof Hausser细菌计数板)使用后应立即在水龙头下用水冲净,必要时
可用95%酒精浸泡,或用酒精棉轻轻擦拭,切勿用硬物洗刷或抹擦,以免损坏网格刻度。洗涤完毕镜检计数区是否
残留菌体或其他沉淀物,若不干净,则必须重复洗涤至洁净为止。洗净后自行晾干或用吹风机吹干,放入盒内保存
。
(4)一般玻璃器皿的洗涤法三角瓶、培养皿、试管等可用毛刷蘸洗涤剂或去污粉或肥皂洗去灰尘、油污、无机盐
等物质,然后用自来水冲洗干净。如果器皿要盛高纯度的化学药品或者做较精确的实验,可先在洗液中浸泡过夜,
再用自来水冲洗,最后用蒸馏水洗2~3次。洗刷干净的玻璃器皿烘干备用。
染菌的玻璃器皿,应先经121℃高压蒸汽灭菌20~30min后取出,趁热倒出容器内的培养物,再用热的洗涤剂溶液洗
刷干净,最后用水冲洗。染菌的移液管和毛细吸管,使用后应立即放入5%的石炭酸溶液中浸泡数小时,先灭菌,
然后再冲洗。
(5)含有琼脂培养基的玻璃器皿的洗涤法先用小刀或镊子、玻璃棒将器皿中的琼脂培养基刮下。如果琼脂培养基
已经干燥,可将器皿放在少量水中煮沸,使琼脂熔化后趁热倒出,然后用水洗涤,并用刷子沾洗涤剂擦洗内壁,然
后用清水冲洗干净。
如果器皿上沾有蜡或油漆等物质,可用加热的方法使之熔化后揩去,或用有机溶剂(苯、二甲苯、丙酮等)擦拭;
如器皿沾有焦油、树脂等物质,可用浓硫酸或40%氢氧化钠溶液浸泡,也可用洗涤液浸泡。
(6)光学玻璃的清洗光学玻璃用于仪器的镜头、镜片、棱镜、玻片等,在制造和使用中容易沾上油污、水溶性污
物、指纹等,影响成像及透光率。清洗光学玻璃,应根据污垢的特点、不同结构选用不同的清洗剂、清洗工具及清
洗方法。
清洗镀有增透膜的镜头,如照相机、投影仪、显微镜的镜头,可用30%的酒精可70%的****配制清洗剂清洗。清洗
时应用软毛刷或棉球沾少量清洗剂,从镜头中心向外做圆周运动。切忌将镜头浸泡在清洗剂中清洗;清洗镜头不得
用力擦拭,否则会划伤增透膜,损坏镜头。清洗棱镜、平面镜的方法,可依照清洗镜头的方法进行。
光学玻璃表面生霉后,光线在其表面发生散射,使成像模糊不清,严重者将使仪器报废。生霉原因是霉菌孢子在温
度湿度适宜和有营养物时生长成形成霉斑。消除霉斑可用0.1%~0.5%的乙基含氢二氯硅烷与无水酒精配制的清洗剂
清洗,潮湿天气还需掺入少量的****,或用环氧丙烷、稀氨水等清洗。使用上述清洗剂也能清洗光学玻璃上的油脂
性雾、水湿性雾和油水混合性雾,其清洗方法与清洗镜头方法相似。
3 洗涤工作注意事项
(1)任何洗涤方法,都不应对玻璃器皿造成损伤。所以不能使用对玻璃器皿有腐蚀作用的化学试剂,也不能使用
比玻璃硬度大的制品擦拭玻璃器皿。
(2)用过的器皿必须立即洗刷,放置太久会增加洗刷的困难。
(3)含有对人有传染性或非传染性致病菌的玻璃器皿,应先浸在5%石炭酸溶液内或经蒸煮、高压灭菌后再行洗涤
。
(4)盛过有毒物质的器皿,不要与其他器皿放在一起。
(5)难洗涤的器皿不要与易洗涤的器皿放在一起,以免增加洗涤的麻烦。有油的器皿不要与无油的器皿混在一起
,否则本来无油的器皿沾上了油污,浪费药剂和时间。
(6)强酸、强碱及其他氧化物和挥发性的有毒物品,都不能倒在洗涤槽内,必须倒在废液缸中。
(7)用过的升汞溶液,切勿装在铝锅等金属容器中,以免引起金属的腐蚀。
(8)盛用液体培养物的器皿,应先将培养物倒在废液缸中,然后洗涤。切勿将培养物尤其是琼脂培养物倒入洗涤
槽中,否则会逐渐阻塞下水道。
(9)使用洗涤液时,投入的玻璃器皿应尽量干燥,以避免稀释洗涤液。如要去污作用
更强,可将之加热至40~50℃(稀铬酸洗液可以煮沸)。器皿上带有大量有机质时,不可直接加洗涤液,应尽可能
先行清除,再用洗涤液,否则洗涤液会很快失效。用洗涤液洗过的器皿,应立即用水冲洗至无色为止。洗涤液有强
腐蚀性,使用时应注意防护,如溅于桌椅上,应立即用水洗并用湿布擦去。皮肤及衣服上沾有洗涤液,应立即用水
洗,然后用苏打(碳酸钠)水或氨液中和。
(10)注意安全!洗涤前应检查玻璃器皿是否有裂缝或者缺口。我们实验室已经有好几个被玻璃器皿划伤的了,最
严重的一个手上缝了五针(当时手上还戴着乳胶手套)!如果这时碰巧器皿上沾有有毒或致癌物质,那后果就不是
一般的麻烦了。