实验干货：裸鼠成瘤（CDX模型）之经验分享

动物选择

一般选择4-6周龄Nude裸鼠，需要提前到SPF环境中适应1周。

接种部位与接种细胞量

接种部位常为皮下，静脉或原位；细胞量一般是5*106个/200ul，但是不同的细胞系的接种量略有差别。

成瘤时间

皮下接种的细胞一般会在1-2周成瘤，一般不会超过1个月；尾静脉和腹腔接种的细胞一般也是1周左右，需要密切观察动物的体重与状态进行判断。

为什么肿瘤不长？

如果细胞接种后超过预期的观察时间仍未成瘤，需要从一下方面进行排查原因：一是细胞活力，细胞活力是影响肿瘤形成的重要原因，活力不够不能成瘤，因此细胞消化下来PBS清洗后要尽快接种；二是动物选择，选择的裸鼠周龄不宜过大，否则也会增大成瘤难度（如果还未成瘤建议更换缺陷程度更高的Nod-scid小鼠，NOG小鼠）；三是饲养环境，环境影响动物状态，状态差的鼠容易发生死亡，不易成瘤。

为什么瘤子长起来又消失？

很可能开始我们观察到的肿瘤是炎症反应，到后来肿瘤细胞被小鼠自身吸收，需要继续观察肿瘤细胞吸收之后是否还能长出来，长不出来建议分析上述原因重新实验

需要观察什么？

在肿瘤长出后，需要密切观察动物的状态，体重和瘤体积。瘤体积的测量一般采用公式V=ab2/2进行计算。动物体重的增加活着减少量，直接反应着动物的整体状态，评估肿瘤是否出现转移等。

如何判断肿瘤是否出现了转移？

小动物活体成像。如果接种的肿瘤细胞带有荧光标签或者荧光素酶，可以借助小动物活体成像仪进行观察瘤细胞的大小和转移情况。